Tout commence par la fécondation au moment de la saillie, environ 1250 millions de spermatozoïdes qui partent pour un voyage dans le corps de la femelle, des nageurs qui avancent à la vitesse de 1,5 mm à l’heure jusqu’à l’ovule expulsé de l’ovaire qu’ils doivent pousser sur un tapis de cils vibratiles. Ils n’ont aucune réserve de nourriture et vont s’épuiser en 3 jours s’ils ne trouvent pas l’ovule, qui elle va mourir en 24 h.
La femelle peut être couverte par plusieurs mâles, c’est alors la fécondation de plusieurs ovocytes par leur semence (superfécondation).
Le spermatozoïde vainqueur de la course s’enfonce dans l’ovule qui lui est 85 000 fois supérieure en volume, il perd son flagelle et ses éléments de perforation, la fusion des deux noyaux va s’opérer, la combinaison des chromosomes et des gènes va s’établir, rapidement (moins d’une heure), les caractères des futurs chiots ou louveteaux sont déterminés : sexe, couleur, tempérament et caractère.